Terminam "mikroskopija" ir grieķu saknes. Tulkojumā tas nozīmē objektu izpēti, izmantojot augstas precizitātes instrumentus. Pēdējā laikā arvien populārāka kļūst fluorescence un elektronu mikroskopija.
Izšķirtspēja
Zem tā, kā likums, viņi saprot minimālo attālumu, kādā var atrasties skaidri atšķirami objekti. Iespiešanās pakāpe mikroskopiskajā pasaulē, spēja ņemt vērā pētāmā elementa izmēru būs atkarīga no iekārtas izšķirtspējas. Pie liela palielinājuma objektu robežas var saplūst. Attiecīgi ir noteiktas robežas, pēc kurām elementu tuvināšanai nav nozīmes.
Luminiscences mikroskopijas metode: mehānisms
Kad vielas absorbētā enerģija tiek pārvērsta redzamā starojumā, rodas spīdums. To sauc par luminiscenci. Šī parādība ir saistīta ar faktu, ka dažas vielas gaismas ietekmē sāk izstarot starus ar atšķirīgu (parasti lielu) viļņa garumu. Turklāt dažiem objektiem, kuriem normālā apgaismojumā ir noteiktskrāsu, ultravioletā starojuma ietekmē maina to krāsu.
Specifikācija
Priekšmets, kas nav redzams ultravioletajā gaismā, var izstarot spilgtu spīdumu, ja to apstrādā ar īpašu vielu. Tajā elementi tumsā mirdz dažādās krāsās. Starojuma stiprums ir atšķirīgs, bet, kā likums, tas ir mazs. Šajā sakarā fluorescences mikroskopija ir efektīva aptumšotā telpā. Izmantojot šāda veida pētījumus, objekts tiek aplūkots gaismā, ko tas pats izstaro. Audu, šūnu ķīmiskais sastāvs ietekmēs pētījuma kvalitāti. Fluorescences mikroskopija zināmā mērā tiek uzskatīta par histoķīmisku pētījumu.
Klasifikācija
Fluorescences mikroskopija var būt primāra vai sekundāra. Pēdējā gadījumā objekts tiek apstrādāts ar īpašiem savienojumiem, kas piešķir spīdumu. Primārā fluorescējošā mikroskopija ir balstīta uz paša elementa spēju izstarot gaismu.
Aprīkojums
Fluorescences mikroskopija tiek veikta, izmantojot dažādas ierīces. To galvenais elements ir apgaismotājs. Tas ir aprīkots ar UV lampu. Turklāt ierīcēs tiek izmantots filtru komplekts. Dažās ierīcēs ir diezgan daudz dažādu konfigurāciju. Atkarībā no tā, kāda krāsa tiek izmantota luminiscences ierosināšanai - ultravioletā vai zilā, starp gaismas avotu un pētāmo objektu tiek novietots atbilstošs filtrs. Tā kā mikroskopiskā elementa mirdzums ir enerģētiski vājāks par aizraujošo gaismu, tas tiks uztverts tikai ar vienu nosacījumu. Pārmērīgie stari no avota ir jānogriež ar dzelteni zaļu filtru. Tas atrodas uz ierīces okulāra. Visizteiktākā luminiscences ietekme būs tad, kad filtrs pilnībā nogriež no gaismas avota izplūstošos starus.
No kā sastāv redzamās gaismas instalācija? Tajā ir spilgts gaismas avots un bioloģiskais mikroskops. Starp ierīces spoguli un lampu ir novietots zili violets filtrs. Tas var būt FS-1, UFS-3 un tā tālāk. Dzeltenais filtrs tiek uzlikts uz mikroskopa okulāra. Ar viņu palīdzību uz objekta nokrīt zili violeta gaisma. Tas uzbudina luminiscenci. Bet šī gaisma var traucēt redzēt mirdzumu. Tāpēc ceļā uz aci to nogriež dzeltens filtrs. Apgaismojums tiek iestatīts pēc Kēlera metodes, ar vienu izņēmumu. Kondensatora diafragmai jābūt pilnībā atvērtai. Pārbaudot, ir svarīgi izmantot nefluorescējošu iegremdējamo eļļu. Lai samazinātu tā mirdzumu, tam pievieno nitrobenzolu (2-10 pilieni / 1 g).
Luminiscences mikroskopija: pielietojumi mikrobioloģijā
Šā veida pētījuma priekšrocības ir:
- Krāsu attēlveidošanas iespēja.
- Augsta kontrasta pašizstarojoši elementi uz melna fona.
- Noteiktu veidu vīrusu un mikrobu noteikšana un lokalizācija.
- Spēja mācīties caurspīdīgi un necaurspīdīgidzīvi organismi.
- Dzīvības procesu izpēte to dinamikā.
Jāsaka arī, ka luminiscences mikroskopija veicina labāko histo- un citoķīmijas metožu, ekspresdiagnostikas izstrādi.
