Šis raksts būs veltīts nokrišņu reakcijas fenomenam. Šeit mēs apskatīsim šīs parādības formulējuma iezīmes, difūzijas fenomenu, vispārīgās īpašības, lomu cilvēka dzīvē un daudz ko citu.
Ievads fenomenā
Nokrišņi ir seroloģiska tipa parādība, kuras laikā šķīstošie antigēni mijiedarbojas ar antivielām un rezultātā tiek novērota izgulsnēšanās - nogulsnes.
Kopējā nokrišņu reakcijas pazīme ir tāda forma antigēna un antivielu koordinēta ietekme. Šāda veida mijiedarbība ļauj noteikt nezināmu antigēnu klātbūtni pārbaudāmajā vielā, pievienojot zināmas antivielas un antigēnus. Nokrišņu process bez sāļu klātbūtnes noritēs sliktāk, un vislabākais optimālais ir diapazonā no 7,0 līdz 7,4 pH.
Reakcijas sastāvdaļas
Starp nokrišņu reakcijas sastāvdaļām ir trīs galvenie elementi:
- Antigēns ar molekulāru raksturu. Tas ir smalkā tipa stāvoklī, citiem vārdiem sakot, tasšķīstošs. Šādu antigēnu sauc arī par precipitogēnu, kas ir lizāts vai audu ekstrakts utt. Precipitogēnam ir raksturīga atšķirība no aglutinogēna, kas ir to daļiņu lielumā, no kurām tas sastāv. Aglutinogēnam ir raksturīgs šūnu izmērs, un nokrišņu daudzums ir proporcionāls molekulas lielumam. Antigēna šķīdumam ir raksturīga caurspīdīgums.
- Cilvēka asins serumā, kā arī imūndiagnostikas serumā atrasta antiviela, kas satur pētītās antivielas.
- Elektrolīti ir nātrija hlorīda šķīdumi, kas ir izotoniski.
Precipitogēna ražošana
Izgulsnēšanās reakcijas iestatīšana nav iespējama bez nokrišņu gēna, ko iegūst, samaļot materiālus un ekstrahējot no tiem proteīna antigēnus. Ekstrakcija notiek ar vārīšanu vai citām metodēm.
Lizāti, kā arī audu un orgānu ekstrakti, asins serums, dažāda veida filtrāti, kuru pamatā ir mikrobu buljonu kultūras, kā arī mikroorganismu un autolizātu vielu sāls ekstrakts ir pārsteidzoši. nokrišņu piemēri.
Iestatīšanās nokrišņu laikā
Tagad apskatīsim nokrišņu reakcijas iestatīšanas metodi.
Tiek veikta gredzenveida izgulsnēšanas reakcija, kas notiek speciāli sagatavotās mēģenēs. Serumu ievada trauku dobumā, ar pipetes snīpi izlejot pāri sienai. Pēc tam uz augšu rūpīgi uzklāj atbilstošu daudzumu nogulsnētāja un pēc tam cauruli no horizontālas novieto vertikālā stāvoklī. Iestatīšana un nokrišņu reakcijas ņemšana vērā ir ļoti rūpīga darbība. Rezultāts tiek reģistrēts pēc b alta gredzena parādīšanās uz robežas starp antigēnu un antivielu. Ja reaģējošie reakcijas elementi atbilst viens otram, tad tie saistās, bet tas kļūst pamanāms pēc ilgstošas to mijiedarbības
Arī nokrišņu reakcija tiek veikta Petri trauciņā vai uz glāzes priekšmetstikliņus, kur pārnes agara želeju, uzklājot to nelielā slānī. Pēc tam, kad tas ir sacietējis želejā, tiek izgriezts neliels skaits iedobju, kurās tiks ievietoti antigēni un antivielas. Ir divi veidi, kā veikt šo darbību: radiālās imūndifūzijas metode un dubultā imūndifūzija.
Vispārīga informācija
Nokrišņu darba mehānika ir līdzīga aglutinācijas ierīcei. Imūnā tipa seruma ietekmē antigēns, kas jau ir nonācis reakcijā, samazina tā dispersijas pakāpi. Svarīgs nosacījums ir gan seruma, gan antigēna caurspīdīgums.
Jūs varat uzlabot reakcijas reģistrāciju, ja uz antivielām uzklājat antigēnus. Rezultātā var novērot nogulšņu parādīšanos gredzena formā. Šo parādību sauc par gredzenveida nokrišņiem, un to veic īpašās caurulēs, kuru diametrs ir no 2,5 līdz 3,5 mm. Viens no izplatītākajiem nokrišņu reakcijas piemēriem ir Sibīrijas mēra diagnoze.
Nokrišņi ļauj noteikt difterijas kultūras toksicitātes līmeni agarā.
Aplūkojamās reakcijas laikā.notiek antigēnu kompleksu un antivielu nogulsnēšanās. Nokrišņi ir imunoloģiska parādība, kas ļauj noteikt antivielu daudzumu slima vai vakcinēta cilvēka un dzīvnieku asins serumā.
Titrēšanas sekas
Ir svarīgi zināt, ka dati, kas iegūti, titrējot ar iepriekš minēto metodi, nav kvantitatīvi nosakāmi. Lai izveidotu un analizētu ietverto antivielu skaita kvantitatīvo novērtējumu, M. Heidelbergers un E. Kabats izstrādāja īpašu reakcijas metodi, kas balstās uz ekvivalences zonas meklēšanu un identificēšanu. Antigēnu vecuma skaita sajaukšana ar nemainīgu antiseruma tilpumu noved pie sākotnēji izveidoto nogulšņu palielināšanās, un pēc tam atkal samazinās, palielinoties spējai izšķīdināt antigēnu kompleksus. Nosakot antivielu daudzumu katrā mēģenē esošajos supernatantos, var konstatēt, ka noteiktam skaitam trauku ar antivielām trūks šķidruma. Šeit, salīdzinot ar citām mēģenēm, veidosies lielākās nogulsnes. Pateicoties tam un antigēno proteīnu nogulšņu atņemšanai no olb altumvielu kopējās vērtības, ir iespējams iegūt precīzu antivielu vērtību, kas atrodas konkrētā pētāmā seruma tilpumā. Turklāt nogulšņu proteīna molekulu daudzumu nosaka pēc slāpekļa daudzuma vai izmantojot kolorimetriskās metodes.
Vērtību novērtēšana
Novērtējot nokrišņu vērtības diagnostikas metodoloģijā, jāņem vērā iespēja, ka imūnserumā būs antiviela, kurai nepiemīt nogulsnēšanās īpašības, no kā izriet, ka pašas nogulsnes var nebūt veidojas pēc reakcijas ar antigēniem. Šādu molekulu sarakstā ir nepilnīgas antivielas un dažas sugas no gamma-A globulīnu grupas.
Nokrišņu reakcija laboratorijas apstākļos atrod savu pielietojumu dažāda veida modifikācijās. Piemēram, termoprecipitācijas reakciju izmanto, lai noteiktu botulisma, Sibīrijas mēra uc baktēriju antigēnus, kas netiek pakļauti termiskai denaturācijai. Atšķirībā no gredzenveida izgulsnēšanas, šāda veida reakcijās izmanto attiecīgā materiāla filtrātus vārītā stāvoklī.
Izgulsnēšanas reakcijas analīze kompleksā maisījumā neļauj raksturot atsevišķu maisījuma elementu īpašības. Šādos gadījumos cilvēks izmanto nogulsnēšanas metodi agarā, kā arī izmanto imūnelektroferēzi.
Difūzi nokrišņi
Šajā pētniecības jomā pastāv difūzās nokrišņu reakcijas (RPD) jēdziens. Tas ir balstīts uz antivielu un šķīstošo antigēnu spēju difundēt gēlā. Difūzija ir noteiktas vielas molekulas spēja iekļūt citas vielas molekulās, ko izraisa termiskā kustība.
Gels ir dispersa tipa sistēma, kurā šķidrā fāze ir vienmērīgi sadalīta cietajā fāzē. Visbiežāk šādai reakcijai tiek izmantots agara gels.
Pēc parametru norādīšanas plkst.apstākļos, kādos molekulas var difundēt viena pret otru, to satikšanās pavadīs antigēna + antivielu kompleksa veidošanās. Šāds jaunveidojums spēj izkliedēties, atrodoties pašā gēlā, un tas nogulsnēs, iegūstot sloksnes formu, ko var noteikt ar neapbruņotu aci. Ja antigēns un antiviela ir homologi, josla neveidosies.
Izveidojot apstākļus, kādos notiks difūzija, atrodoties agara slānī, ir jālej komponenti, bet kopējo iedobju skaitu un to relatīvo stāvokli nosaka izlemiet, kāda veida uzdevums ir nepieciešams. RPD sniedz personai iespēju atklāt un identificēt nezināmus izolētus vīrusus, pārbaudot, izmantojot zināmus antivielu serumus.
Pieteikums
Nokrišņi tiek plaši izmantoti ne tikai slimību diagnostikā, bet arī atrod pielietojumu tiesu medicīniskajā ekspertīzē. Grūti iedomāties analīzi, kurā būtu iespējams noteikt asins sugu, orgāna vai audu daļu, kas atrasta uz nozieguma ieroča, kas neizmanto nokrišņu reakciju. Šajā procesā tiek izmantoti izgulsnējoši serumi, kurus iegūst, imunizējot dažādus dzīvniekus un putnus. Ir svarīgi, lai seruma titra līmenis nebūtu mazāks par 1:10 000, un tam jābūt arī pietiekami specifiskam. No konstatētās asiņu vietas vai tās garozas tiek izgatavots izraksts fiziskai. risinājums, kas tiks pakļauts tālākizgulsnošs serums. Saskaņā ar šo reakciju ir iespējams noteikt gan cilvēku, gan dzīvnieku audu un orgānu proteīnu veidus. Duļķainu ekstraktu iegūšana liek ķerties pie nokrišņiem uz agara.
Secinājumi
Analizējot nolasīto informāciju, varam secināt, ka nokrišņu reakcijas cilvēkam ir ārkārtīgi svarīgas, jo ļauj diagnosticēt dažādus antigēnus, izmantojot antivielas, šī parādība tiek plaši izmantota arī tiesu medicīnas ekspertīzē un ļauj identificēt nokrišņu veidu. asinis, audi vai orgāns saistībā ar konkrētu priekšmetu. Ir vairāki nokrišņu veidi un metodes, kuras tiek izmantotas atbilstoši risināmās problēmas jaunajām vajadzībām.
