Mūsdienu medicīnā ir specifiskas diagnostikas metodes, kas ļauj noteikt slimību etioloģiju cilvēkiem, pamatojoties uz patogēna definīciju, ģenētiski svešām vielām, kas stimulē imūnreakciju, nukleīnskābēm, kā arī alerģiskām un imūnajām izmaiņām kas rodas viņa darbību dēļ. Mūsdienās RIA plaši izmanto imunoloģijā un virusoloģijā, tas ir, radioimūno testā, kuras mērķus, sastāvdaļas, kursu, kuru uzskaiti, mēs aplūkosim šajā rakstā. Šis tests spēj noteikt antigēnus to mijiedarbības ar antivielām rezultātā.
Definīcija
RIA ir šķidrumos esošo bioloģiski aktīvo vielu diagnostikas metode, kuras pamatā ir antigēnu reakcija ar antivielām, izmantojot radionuklīdu iezīmētas analogas vielas, kurām ir īpašas saistīšanas sistēmas. Pēc viņu mijiedarbībasveidojas imūnkomplekss, kas tiek atdalīts un tiek pētīta tā radioaktivitāte. Ir zināms, ka radioimūno testu veic, izmantojot standarta reaģentu komplektus.
Katrs reaģents spēj noteikt vienas konkrētas vielas koncentrāciju. No cilvēka paņemto bioloģisko šķidrumu sajauc ar reaģentu, pēc inkubācijas perioda atdala brīvās un saistītās radioaktīvās vielas, pēc tam veic radiometriju un aprēķina rezultātus. Vielu marķēšanai izmanto joda izotopu. Tas ir atzīmēts un pievienots noteiktā daudzumā.
Pieteikums
Radioimūno analīzi plaši izmanto medicīnā un mikrobioloģijā. To lieto sirds un asinsvadu slimību, endokrīno un citu ķermeņa sistēmu slimību diagnosticēšanai. RIA bieži izmanto arī, lai noteiktu neauglības cēloni, augļa attīstības patoloģiju. Onkoloģijā šo analīzi veic, lai noteiktu jaunveidojumu marķierus, lai varētu uzraudzīt ārstēšanas efektivitāti. Imunoloģijā RIA izmanto, lai pētītu imūnglobulīnu, enzīmu, olb altumvielu un tā tālāk klātbūtni asinīs. Mūsdienās šī analīze ļauj noteikt dažādu hormonu koncentrāciju līdz miljonajai daļai no viena grama. Tādējādi radioimūnās asins analīzes tiek plaši izmantotas kardioloģijā, onkoloģijā, endokrinoloģijā, ginekoloģijā un virusoloģijā.
RIA metodes
Ir pieņemts atšķirt vairākas analīzes metodes atkarībā no raksturareakcijas:
- Nekonkurējošo metodi raksturo tādi reakcijas komponenti kā standarta un nosakāmi antigēni, buferšķīdums, ar izotopu iezīmētas antivielas, noteiktas antivielas, kas saistās ar sorbentu. Pārbaudāmajām antivielām pievieno antigēnu. Pēc inkubācijas parādās antigēnu-antivielu kompleksi, sorbentu mazgā, pievieno iezīmētās antivielas, kas saistās ar kompleksā esošo antigēnu. Radioaktivitāte ir atkarīga no pārbaudāmā antigēna koncentrācijas.
- Konkurētspējīgu radioimūno testu nosaka antigēnu konkurence. Šeit ir tādi reakcijas komponenti kā kontroles un noteiktie antigēni, buferšķīdums, noteiktas antivielas, kas saistās ar sorbentu, kā arī ar izotopu iezīmēts antigēns. Diagnoze sākas ar izmeklējamā antigēna ievadīšanu. Uz sorbenta veidojas antigēna-antivielu komplekss. Pēc tam sorbentu mazgā un marķēto antigēnu injicē. To darot, tas saistās ar antivielu. Ar skaitītāju palīdzību tiek mērīta reakcija un radioaktivitātes daudzums. Tas būs apgriezti proporcionāls antigēna daudzumam paraugā.
- Netiešā metode ir visizplatītākā. Šajā gadījumā reakcijas komponenta radioimūno testā ir tāds kā kontroles un testa serums, antigēni vai antivielas, kas ir piesaistītas sorbentam, antivielas, kas marķētas ar izotopiem, buferšķīdumi. Diagnosticētās antivielas vai antigēni reaģē ar antigēniem vai antivielām, kas ir saistītas ar sorbentu. Pēc tam inkubātu izņem, ievada iezīmētās antivielas, kas saistās arantigēna-antivielu kompleksi.
Analīzes metodoloģija
Tātad, radioimūntestu veic, izmantojot īpašus reaģentus. Komplekti ir standarta, tāpēc nekādas kļūdas vai pārkāpumi nav pieļaujami. Diagnostikas rezultāti ir ticami. Analīze tiek veikta no rīta, tāpēc no cilvēka tiek ņemtas venozās asinis. Laboratorijā no asinīm tiek atdalīts serums, kas tiks izmantots RIA. Šis serums ir sajaukts ar reaģentiem. Iegūtais maisījums tiek inkubēts noteiktā temperatūrā termostatā.
Iegūtajā maisījumā tiek atdalīti brīvie un saistītie izotopi. Pēc tam tiek pārbaudīts saņemtais materiāls, un tiek aprēķināti rezultāti. Radioimūntesta mehānismam ir vairākas iespējas. Iepriekš aprakstītais paņēmiens ir šķidrās fāzes RIA, jo visas sastāvdaļas ir šķidrā stāvoklī. Ir RIA un cietā fāze, kur antivielas tiek ievietotas nesējā, kas nešķīst šķidrumā.
Diagnostikas pieejamība
Šīs diagnostikas metodes izmantošana medicīnā ar katru gadu kļūst arvien populārāka. Nesen radioimūntests ir kļuvis par standarta diagnostikas metodi, ko ārsts var izrakstīt, veicot galīgo diagnozi. Ilgu laiku šāda veida analīzes tika veiktas tikai laboratorijās, šodien tā ir kļuvusi par izplatītu pētījumu metodi. Bet RIA prasa izmantot dārgu aprīkojumu (gamma skaitītājus), un reaģentu komplektiem ir īss kalpošanas laiks. Tas viss ir galvenais šādas analīzes trūkums, kas nosaka todārgas izmaksas.
Turklāt RIA nesen ir sācis aizstāt modernākas pētniecības metodes, kurām nav nepieciešama mijiedarbība ar izotopiem. Tie ietver enzīmu imūntestu. Tādējādi RIA ir vēlama daudzās klīnikās. To jau sen izmanto lielajās pilsētās un diagnostikas centros, bet parastās mazpilsētu slimnīcās šo analīzi praktiski neizmanto tās augsto izmaksu dēļ.
RIA cieņa
Radioimūntestam ir daudz priekšrocību. Tas ir diezgan specifisks un ar augstu jutību, kas ļauj noteikt bioloģiski aktīvo vielu klātbūtni neticami mazos daudzumos. Šī analīze tiek veikta ļoti vienkārši, cilvēkam ir jāziedo tikai venozās asinis. Testa rezultāti ir 100% precīzi un gatavi jau nākamajā dienā. RIA var arī viegli automatizēt. Tādējādi šī analīze ļauj identificēt proteīnus, kas ir infekciozo baktēriju atkritumi, kas norāda uz infekcijas klātbūtni organismā.
Diagnoze virusoloģijā
Perspektīvākais RIA ir virusoloģijai, jo tas ļauj ātri identificēt vīrusu patogēnus. Tas saistīts ar to, ka pēdējos gados pieaug saslimstība ar dažādām infekcijām, kas izplatās lielā ātrumā, izraisot cilvēku mirstību. Tas jo īpaši attiecas uz valstīm, kurām nav augsta līmeņasociālā un ekonomiskā attīstība (Tālo Austrumu valstis), radioimūntests šeit ir vienkārši neaizstājams. Mikrobioloģija izmanto šo diagnostikas metodi arī patogēno baktēriju izraisīto infekcijas slimību noteikšanai. Piemēram, RIA plaši izmanto vēdertīfa noteikšanai. Pirmajās slimības dienās pirms ārstēšanas iecelšanas ir nepieciešams veikt fekāliju un vemšanas pētījumu. Tomēr diagnostikas rezultāti tiks iegūti pēc ilga laika. Šeit RIA nāk palīgā, analīze ļauj īsā laikā identificēt slimības izraisītāju. Cilvēks nodod asinis, nākamajā dienā pētījuma rezultāti ir gatavi. Šī analīze palīdz noteikt precīzu diagnozi.
Rezultāti
Radioimūntests pašlaik ir viena no jutīgākajām diagnostikas metodēm. To izmanto, lai analizētu jebkuru vielu, pret kuru var iegūt antivielas. Šī metode ļauj izgatavot daudzus paraugus mazākajā pētāmā šķidruma tilpumā, kā arī reģistrēt rezultātus pēc iespējas īsākā laikā, jo to var pilnībā automatizēt. Šo analīzi 1950. gados izstrādāja Solomons Bērsons. Trīsdesmit gadus vēlāk tas kļuva plaši izplatīts. Līdz šim RIA nav simtprocentīgas alternatīvas, jo analīzei ir augsta jutība. RIA izmanto dažādās medicīnas nozarēs, kā arī mikrobioloģijā un virusoloģijā.
Beidzot
Metodes izmantošana virusoloģijā mūsdienās ir ļoti aktuāla, jo tā dodspēja izmeklēt infekciju izplatību, noteikt precīzu diagnozi un noteikt specifisku ārstēšanu. Šī problēma ir īpaši aktuāla valstīm, kurām ir zems ekonomikas un sociālās attīstības līmenis. Arī šī analīze ļauj noteikt hormonu un enzīmu daudzumu cilvēka organismā. Lai iegūtu ticamus rezultātus, pētniekam ir tikai jāziedo asinis analīzei. Medicīna nestāv uz vietas, līdz ar radioimūntestu parādās jaunas pētījumu metodes, bet RIA joprojām ir viens no medicīnas diagnostikas līderiem.
