Mikroskopiskās novērošanas iegremdēšanas metode ietver īpaša šķidruma ievadīšanu starp ierīces lēcu un pētāmo objektu. Tas uzlabo spilgtumu un paplašina attēla palielinājuma jomu. Tādējādi objektu var ievērojami pietuvināt un tā mazākos elementus apskatīt, nemainot aprīkojumu. Attiecīgi šķidrumu sauc par iegremdēšanu. Tas var kalpot kā dažādas kompozīcijas. Vispopulārākā ir iegremdējamā eļļa. Apsveriet tās funkcijas sīkāk.
Vispārīga informācija
Pirmā imersijas eļļa mikroskopijai bija ciedra. Tomēr tam bija viens būtisks trūkums. Laika gaitā tā īpašības mainījās, un tas neļāva iegūt vēlamos rezultātus. Brīvā dabā šķidrums sāka pamazām kondensēties (līdz sacietēšanai). Attiecīgi mainījās arī refrakcijas indekss. 20. gadsimtā sāka ražot sintētisko imersijas eļļu. Šim šķidrumam nebija iepriekš minēto trūkumu.
Imercijas eļļas standarti
Atslēgašķidruma parametri ir noteikti GOST 13739-78. Saskaņā ar standartu iegremdējamajai eļļai ir:
- refrakcijas indekss nd=1,515±0,001;
- caurlaidība spektra diapazonā no 500 līdz 700 nm ar slāņa biezumu 1 mm - 95%, no 400 līdz 480 nm - 92%;
Optimālā temperatūra, kurā var izmantot iegremdējamo eļļu, ir 20 grādi. Ir arī starptautiski standarti. Saskaņā ar ISO 8036/1 laušanas koeficients ir 1,518 + 0,0005, un caurlaidība 10 mm slānī spektra diapazonam no 500 līdz 760 nm ir 95%, bet pie 400 nm tā ir 60%.
Norādītie parametri atbilst nefluorescējošai iegremdēšanas eļļai. Standarts ISO 8036-1/2 nosaka šķidruma īpašības luminiscencei. Caurlaidība spektra diapazonā no 500 līdz 700 nm 10 mm slānī ir 95%, no 365 līdz 400 nm - 60%.
Grūtības saistībā ar parametru neatbilstībām
Identificējamas atšķirības iepriekšminētajos standartos var izraisīt konkrēta objektīva veiktspējas pasliktināšanos, ja tiek izmantots nepiemērots šķidrums. Rezultāts:
- Kontrasts ir samazināts sfēriskās aberācijas dēļ.
- Pētīšanas objekta lauks ir iekrāsots.
- Apgaismojums pētāmā objekta plaknē un tā attēla veidošanās zonā kļūst nevienmērīgs.
- Attēls kļūst izplūdis.
Nianses
Optiskajiem mikroskopiem ir augšējā izšķirtspējas robežanedaudz vairāk kā 100 reizes. Šajā palielinājuma līmenī pētāmā objekta apgaismojumam jābūt augstas kvalitātes. Pretējā gadījumā iegūtais attēls būs tik tumšs, ka objektu nebūs iespējams saskatīt. Fakts ir tāds, ka starp vāka stiklu un objektīvu notiek gaismas laušana un izkliede. Iegremdēšanas eļļa veicina tās lielāku uztveršanu. Rezultātā attēls kļūst skaidrāks.
Gaismas refrakcijas pazīmes
Kā iegūt skaidru priekšstatu? Dažādos medijos gaismas laušana notiek dažādos veidos. Piemēram, staru laušanas leņķi gaisā un stiklā ir atšķirīgi. Pirmajā gadījumā rādītājs ir 1,0, otrajā - 1,5. Tā ir galvenā problēma.
Eļļas izmantošana ļauj samazināt to staru refrakcijas indeksu, kas iet cauri pētāmajam objektam. Fakts ir tāds, ka šķidrumam ir tāds pats parametrs kā stiklam. Rezultātā starp priekšmetstikliņu un objektīvu veidojas viendabīga vide, un lielākā daļa gaismas, kas iet caur objektu, nonāk instrumentā. Tādējādi tiek iegūts skaidrs attēls.
Tehniskie punkti
Parasti iegremdējamo lēcu cilindri ir iegravēti ar eļļu. Pats elements tiek izmantots, ja ir nepieciešama 1,0 vai lielāka diafragma. Šādas "iegremdēšanas" lēcas tiek izmantotas tiešai iegremdēšanai šķidrumā. Šajā sakarā tie ir pilnībā noslēgti. Tas nodrošina augstu lēcu aizsardzību pret eļļas bojājumiem.
Klasifikācija
Eļļas tiek izmantotas praksēdivas viskozitātes: augsta (B tips) un zema (A). Bieži vien uz iepakojuma var atrast informāciju par refrakcijas indeksu. Piemēram, tie ražo iegremdēšanas eļļu (100 ml), kuras refrakcijas koeficients ir 1,515. Šķidrumi ar zemu viskozitāti tiek uzklāti gaisa telpā, bet ar augstu viskozitāti - kopā ar kondensatoriem.
Lietošanas noteikumi
Lai iegūtu skaidru priekšstatu par pētāmo objektu, jums jāievēro diezgan vienkārši ieteikumi:
- Atrodiet pētāmo objektu uz slīdņa lauka centrā ar nelielu palielinājumu. Šim nolūkam tiek izmantots zema palielinājuma objektīvs.
- Pagrieziet tornīti.
- Ievietojiet objektīvu 100x darba stāvoklī.
- Ievietojiet eļļas pilienu uz priekšmetstikliņa, bet otru uz objektīva.
- Pielāgojiet darba attālumu ar precīzu fokusu, līdz objekts ir skaidri redzams.
Strādājot, jābūt uzmanīgiem. Ir svarīgi novērst gaisa nokļūšanu starp segstikliņu un objektīvu.
Imercijas eļļa "Minimed"
Šķidrumu izmanto, strādājot ar jebkura veida ierīču ahromatiskām un apohromatiskām lēcām, izņemot luminiscējošās. Pēc ekspertu domām, kuri ir izmantojuši šo iegremdējamo eļļu, tai ir vairākas noderīgas īpašības. Šķidrums ievērojami uzlabo objekta redzamību, samazinot atspīdumu, gaismas zudumus un optiskās aberācijas. Eļļas izmantošana ievērojami paplašina aprīkojuma iespēju klāstu.
Tīrīšanaaprīkojums
Pēc darba ar iegremdējamo eļļu nepieciešams savest kārtībā ierīci. Tīrīšana jāveic pirms objektīva izžūšanas. Eļļas atlikumu noņemšanai izmanto tīru lēcu papīru. Visu stikla virsmu tīrīšanai tiek izmantota velmēta loksne. Lēcas papīrs ir jāsamitrina ar objektīva šķīdumu un jānoņem visa atlikušā eļļa.
Vēstures fons
Pirmais zinātnieks, kurš izskaidroja iegremdēšanas mehānismu, bija Roberts Huks. 1678. gadā tika izdota viņa grāmata Microscopium, kurā tika sniegti visi paskaidrojumi. 1812. gadā iegremdēšana tika ierosināta kā līdzeklis objektīva aberāciju koriģēšanai. Idejas autors bija Deivids Busters. Ap 1840. gadu tika izgatavotas pirmās iegremdējamās lēcas. Viņu radītājs bija D. B. Amici. Sākotnēji pētnieki kā iegremdēšanas šķidrumu izmantoja anīsa eļļas. Laušanas koeficients bija tuvu stikla refrakcijas indeksam.
